種屬 |
人 |
別稱 |
KASUMI-1+LUC |
組織來源 |
外周血 |
疾病 |
成髓細(xì)胞;急性髓細(xì)胞白血病 |
傳代比例/細(xì)胞消化 |
1:2傳代,維持細(xì)胞濃度在3x105 - 3x106 /ml |
完全培養(yǎng)基配置 |
RPMI1640培養(yǎng)基;20%胎牛血清;1%雙抗 |
簡介 |
該細(xì)胞系是從一名急性髓系白血病(AML)患者的外周血中建立的。這是一個(gè)8號(hào)21號(hào)染色體易位的白血病細(xì)胞系。這種 易位將AML1與ETO(或MTG8)基因并列 ,產(chǎn)生融合基因AML1-ETO(也稱為AML1-mtg或RUNX1-CBF2T1)。因 此 ,細(xì)胞產(chǎn)生嵌合的AML1-ETO蛋白。該蛋白下調(diào)CEBPA mRNA、蛋白和DNA結(jié)合活性 ,這對(duì)粒細(xì)胞的分化至關(guān)重 要。在增殖實(shí)驗(yàn)中 ,培養(yǎng)的細(xì)胞對(duì)白細(xì)胞介素-3 (IL-3)、白細(xì)胞介素-6、粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)、粒細(xì)胞頂體噬 菌體CSF (GM-CSF)有反應(yīng) ,但對(duì)IL-1和IL-5無反應(yīng)。該細(xì)胞復(fù)蘇后需要兩周左右恢復(fù)正常生長。 |
形態(tài) |
原粒細(xì)胞 |
生長特征 |
懸浮生長 |
倍增時(shí)間 |
~48-72h |
培養(yǎng)條件 |
氣相:空氣 ,95% ;二氧化碳 ,5%。 溫度:37攝氏度 ,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
凍存條件 |
凍存液:90%FBS ,DMSO 10%, 或使用非程序凍存液:官網(wǎng)貨號(hào)JY-H040 |
備注 |
該細(xì)胞為懸浮細(xì)胞 ,請(qǐng)注意離心收集細(xì)胞懸液 ,請(qǐng)勿直接倒掉細(xì)胞培養(yǎng)液 ,a) 該細(xì)胞復(fù)蘇后成活率較低 ,會(huì)出現(xiàn)大量 死細(xì)胞和死細(xì)胞碎片 ,培養(yǎng)兩周后有所好轉(zhuǎn)。建議每1-2周對(duì)細(xì)胞進(jìn)行1000rpm , 5mins離心 ,棄掉上清 ,加入新鮮 完全培養(yǎng)液 ,可以去掉部分細(xì)胞碎片和顆粒。培養(yǎng)過程中會(huì)出現(xiàn)死細(xì)胞和細(xì)胞碎片 ,收到郵寄的活細(xì)胞的用戶若發(fā)現(xiàn) 培養(yǎng)物內(nèi)有部分死細(xì)胞和細(xì)胞碎片 ,此為正?,F(xiàn)象。b) 細(xì)胞培養(yǎng)過程中會(huì)有輕微聚團(tuán) ,輕輕吹打開即可。當(dāng)細(xì)胞密度 較大或者培養(yǎng)液變黃時(shí) ,需要及時(shí)進(jìn)行半換液或者完全換液。c) 該細(xì)胞對(duì)血清質(zhì)量較為敏感 ,我?guī)旖ㄗh您使用進(jìn)口大 品牌優(yōu)質(zhì)血清進(jìn)行培養(yǎng)。d) 請(qǐng)注意保持細(xì)胞密度在合適的范圍( 3x105 ~ 3x106 /ml) ,不能過稀。該細(xì)胞為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染Luc的細(xì)胞,隨細(xì)胞傳代次數(shù)的增加,其Luc熒光強(qiáng)度會(huì)逐漸減弱。若實(shí)驗(yàn)要求需要維持熒光強(qiáng)度,可以加入嘌呤霉素進(jìn)行再次篩選。 |
產(chǎn)品使用 |
僅限于科學(xué)研究 ,不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用。 |